反向引物（下游引物）是沿着正链进行延长的。体外扩增DNA，双螺旋是部分或完全打开的，不存在冈崎片段，也不会一段段延长，理论上正反引物都是不间断延长的，和体内DNA自我复制是有区别的。
反向引物（reverse primer）长18bp，引物3’端仍为3个选择性碱基，5’端为14bp的核心序列， 其中核心序列前llbp（GACTGCGTACG）是填充序列，紧接着为特异序列...
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而反向引物（R-primer）长18 bp，其中核心序列 由11 bp 填充序列（GACTGCGTACG）和特异序列 AATT 组成，3'端仍为3 个选择性碱基。
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称之为反向引物 reversed primer
Distribution and copy of the sequence in chromosome is interspecific specificity. According to the highly conservative core sequence,44bp,reverse primer is designed.
该序列在染色体上的分布和拷贝数具有种间的特异性,根据序列中心高度保守的44 bp的ERIC核心序列设计反向引物,可扩增出反映细菌基因组结构特征的谱带。
参考来源 - ERIC·2,447,543篇论文数据，部分数据来源于NoteExpress
反向引物SA4或EM6与研究的所有正向引物组合时产生的多态性条带分子量完全相同， 这些条带可能是由反向单引物扩增而来的。
The reverse primers SA4 or EM6 produced identical polymorphic bands when combined with all the forward primers tested. These bands might be amplified by the reverse primers.
对其阳性克隆扩大培养，大量提取质粒，以T7，SP6为测序引物进行全自动正、反向测序确认。
T7 and SP6 were taken as sequencing primers for forward and backward sequencing identification automatically.
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