方法名称: 炒瓜蒌子-3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的测定-高效液相色谱法
应用范围: 本方法采用高效液相色谱法测定炒瓜蒌子中3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的含量。
本方法适用于瓜蒌子的炮制加工品。
方法原理: 本品粉末置具塞锥形瓶中,加入三氯甲烷超声处理,放冷,补重,摇匀,静置,上清液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长230nm处检测3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇的吸收值,计算出其含量。
试剂: 1. 甲醇
2. 三氯甲烷
仪器设备: 1 仪器
1.1高效液相色谱仪
1.2色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2色谱条件
2.1流动相:甲醇 水=93 7
2.2检测波长:230nm
2.3柱温:室温
试样制备: 1. 称取供试品
精密称定本品粗粉(40℃干燥6h)1g,为供试品。
2. 对照品溶液的制备
精密称取3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇对照品适量,加三氯甲烷制成每1mL含0.12mg的溶液,即得。
3. 供试品溶液的制备
取本品粗粉(40℃干燥6h)约1g,精密称定,置50mL具塞锥形瓶中,精密加入三氯甲烷10mL,密塞,称定重量,超声处理(功率250W,频率40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用三氯甲烷补足减失的重量,摇匀,静置,取上清液作为供试品溶液。
操作步骤: 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长230nm处测定3,29-二苯甲酰基栝楼仁三醇(C44H58O5)的峰面积,计算出其含量。
参考文献: 中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p74。