由非编码小分子RNA(siRNAs,miRNAs)诱导的RNA干涉作为基因功能研究、
基因治疗等新工具,目前已成为分子生物学的研究热点。最近,一种新型小分子RNA-piRNAs在老鼠的生殖细胞中被发现,特异性地与Miwi蛋白结合,被认为是精子发育及合子形成过程中必不可少的。本文就piRNAs的发现、遗传特性和可能的作用模式作一综述,并阐述了研究意义和应用前景。
微小RNA(miRNA)是小分子RNA家族中的一员,内源性非编码基因构成的21~23nt单链小RNA分子,在生物进化过程中保持了高度的保守性,通常由Dicer酶从具有发夹二级结构的RNA前体加工而来,miRNA虽然微小,但它在真核生物发育和基因表达中通过与靶mRNA形成完全或不完全互补配对从而扮演着重要角色。2004年,发现了编码和表达miRNA的第一个病毒——埃博拉病毒(epstein-barrvirus,EBV),最近,miRNA又从肉瘤相关疱疹病毒(kaposi’ssarcoma-as-sociatedherpesvirus,KSHV)和人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)中克隆到,此外,SV40miRNA被认为负调控T抗原(1argeT-antigen,TAg)表达,作者对病毒编码的miRNA及miRNA在最近研究中的预测、表达和功能作一综述。
利用改进的Trizol法首次从鹌鹑血液中提取小分子RNA,比较小分子RNA在组织与血液中的表达差异,为简化小分子RNA的提取程序,提高实验研究效率以及探讨小分子RNA的遗传特性提供可供借鉴的资料。结果发现:①改进Trizol法提取血液中的总RNA,效果显著,条带清晰;②发现血液中只存在一种小分子的miRNAs(18-22bp);③影响小分子RNA提取效率的关键因素包括样本的新鲜程度和RNA酶的污染。研究结果表明,通过改进的Trizol法提取血液中小RNA方法是可行的,小分子RNA在家禽血液中的表达具有特异性,snoRNAs,piRNAs在血液中不表达。