方法很多，常用的是先以浓石炭酸复红加温初染，随即以盐酸酒精或硫酸水脱色，最后用美蓝液复染。如属于抗酸细菌，呈红色，因菌体有抗御酸类脱色的特性，故能保持初染的红色。如属于一般细菌，则呈蓝色，因菌体无抗酸能力，初染的红色被酸类所脱去，故被复染成蓝色。
分支杆菌的细胞壁有特殊的脂类物质——分枝菌酸，分支菌酸厚且呈蜡质，可以抵御酸性酒精的脱色作用。
抗酸性染色法
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