(1)母种分离菌种分离宜采用组织分离法。每年7-10月份是野生长根菇发生的季节。因出土后的子实体常被菇蝇蛀食,菌柄和菌褶中常有小蛆,故利用开伞后的子实体作分离材料,很容易造成污染,分离成功率低。因此,最好选择幼蕾供分离之用。在进行分离之前,要注意检查菇蕾上是否有被蛀的虫孔,若有虫孔则不宜作分离材料。
对分离材料表面灭菌处理,然后从
菌盖中取一小块组织或一小片菌裙,用无菌接种针接种到PDA斜面培养基的中央,在24℃-28℃条件下培养,经6~8天,菌丝在培养基斜面长满。再经转管纯化培养,即可获得纯母种。长根菇菌丝体白色,气生菌丝旺盛,绒毛状,培养基不变色,菌丝层后期边缘带褐色。
配方1;胡萝卜100克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
配方2:马铃薯200克,蔗糖20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁15克,琼脂20克,水1000毫升。
配方3:酵母膏20克,蔗糖20克,磷酸二氢钾1克,磷酸氢二钾0.5克,硫酸镁0.5克,琼脂20克,水1000毫升。
配方4:杂木屑200克,麦麸20克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000毫升。
配方5:马铃薯200克,麦戴50克,葡萄糖18克,磷酸二氢钾2.5克,硫酸镁1.5克,
维生素3,10毫克,琼脂20克,水1000毫升。
上述培养基按常规方法制备、灭菌,接种后,在25℃~26℃条件下培养6-7天,菌丝较为洁白长满料面培养基。
配方1:小麦94%(浸泡过夜,翌日煮沸15分钟),杂木屑5%,石膏1%,料与水比1,.2-1.3,pH自然(以下同)。
配方2:棉籽壳78%,麦麸20%,蔗糖1%,石膏1%。
配方3:杂木屑78%,麦教20%,蔗糖1%,石膏1%。
按常规装瓶、灭菌、接种,置于25℃±1℃培养。750克瓶装原种35-40天长满;15厘米* 26厘米袋装栽培种35天左右长满。在杂木屑、麦麸培养基生长的菌丝洁白,绒毛状,气生菌丝较为发达。