现在推向市场的第三代红霉素———酮内酯类抗生素是使用化学方法将其母核C-3位的L-红霉支糖(L-c lad inose)用酮基替换得到。 因为酮基能避免诱导出MLSB抗性,所以能大大提高对某些红霉素抗性菌的活性. 目的:用红色糖多孢菌(前称糖多孢红霉菌)KR6突变体合成酮内酯类化合物3-脱氧-3-羰基-红霉内酯B,同时,KR6突变体不合成红霉素。方法:以红色糖多孢菌A226基因组DNA为模板,用重叠PCR技术扩增KR6酶域中Tyr2699密码子TAC突变为A la密码子GCC的1 000 bp DNA序列,克隆到载体pWHM3上构建同源重组质粒pWHM3-YA。