受体细胞是指在转化和转导(感染)中接受外源基因的宿主细胞。 受体细胞 受体细胞也叫宿主细胞。受体细胞有原核受体细胞(最主要是大肠杆菌)、真核受体细胞(最主要是酵母菌)、动物细胞和昆虫细胞(其实也是真核受体细胞)。 原核受体细胞中,最常用的宿主细胞是大肠杆菌。 作为基因工程的受体细胞必须具备下面的性能: (1)具有接受外源DNA的能力; (2)一般应为限制酶缺陷型(或限制与修饰系统均缺陷); (3)一般应为DNA重组缺陷型; (4)不适于在人体内或在非培养条件下生存; (5)它的DNA不易转移。 可作为受体细胞的原则: ①便于重组DNA分子导入 受体细胞 ②便于重组DNA分子稳定存在于细胞中 ③便于重组子的筛选 ④遗传稳定性高,易于扩大培养与发酵 ⑤安全性高,无致病性 ⑥最好是内源蛋白水解酶缺失或含量低 ⑦密码子无明显偏爱性 ⑧具有较好的翻译后加工机制,便于真核基因的表达 ⑨理论与实践上具有较高的应用价值 原核生物作为受体细胞的优劣: 优点: 劣势: 受体细胞 (1)不具纤维素壁 1)不具真核蛋白折叠系统 (2)无核膜 (2)不具真核蛋白加工系统 (3)基因组简单,便于遗传分析 (3)蛋白酶降解异源蛋白 (4)单细胞 目前作为受体菌的原核生物有: (1)大肠杆菌 革兰氏阴性菌 a.基因组、遗传背景了解最清楚 受体细胞培养 b.易培养、繁殖迅速 (2)枯草杆菌 革兰氏阳性菌 a.具胞外酶分泌-调节基因,能将表达产物 分泌到培养基; b.无内毒素; c.易于保存与培养。 (3)蓝细菌 受体细胞 a.光能自养型,易于培养; b.与植物密码子和启动子的通用性, 易于表达植物基因 目前,以微生物(主要有大肠杆菌、枯草杆菌和酵母菌)为受体细胞的基因工程在技术上最为成熟,在生物制药中也得到广泛的应用。大肠杆菌虽然是条件致病菌,但是通过人工改造,可以使它成为一个很安全的宿主菌。