本实验于1996—1997年 用昆品系小鼠胎儿原代成纤维细胞饲养层(PMEF)和小鼠ES细胞分离的条件,于1997年分 离与克隆出猪类ES细胞,并比较其与小鼠的异同,为建立猪ES细胞系积累经验和提供有关 参数。
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我们从实验中得出如下结论: 1.以小鼠原代胎儿成纤维细胞(PMEF)饲养层作为分化抑制物,添加 PMEF条件培养液,可以增加胚胎性干细胞的存活时间。
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5d胚龄的囊胚,分离ICM细胞进行培养,以小鼠原代胚胎成纤维细胞(primary mouse embryonic fibroblast,PMEF)作为饲养层,倒置显微镜下观察并记录集落的形成及生长情况,并进行消化传代培养。
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细胞培养制备原代小鼠胚胎成纤维细胞(primarymouseembryonicfibroblast,PMEF),冻存后备用。
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