为了提高酶的表达活力,采用PCR介导的定点突变技术将该酶N-端第二个氨基酸亮氨酸(CUU)突变成缬氨酸(GUU)。构建了突变非融合表达载体pET-32a-manA*,在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了异源非融合表达。
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