分类
 血液生化检查、酶类测定
 原理
 在pH 10的甘氨酸/氢氧化钠缓冲体系中,SDH催化下列反应:
 D-山梨醇+NAD+→D-果糖+NADH+H+
 通过监测340nm处NADH产生的速率,计算出SDH活性。
 试剂
 试剂A:100mmol/L NAD+溶液:4℃避光保存可稳定1周。
 试剂B:用0.1mol/L甘氨酸/氢氧化钠缓冲液(pH 10)配制成20mmol/L D-山梨醇基质液,其中含氯化锌2.0mmol/L。
 操作方法
 试剂A 5μl与血清50μl混合,置37℃水浴5min,再加入1ml预温至37℃的试剂B,迅速混匀并转入37℃恒温比色杯(10mm光径)中,在340nm处监测。延迟时间60s后,每隔30s读取1次吸光度,连续读3min,求出平均每分钟吸光度变化值(△A/min)。在上述条件下,每分钟催化产生1μmol NADH的酶量,定义为1个酶活性单位。
 附注:
 (1)本法线性范围为0~180U/L。批内和批间CV分别为3.9%和5.2%。
 (2)反应试剂中加入2mmol/L锌离子可使酶活性提高10%。
 (3)甘氨酸缓冲液浓度为0.1mol/L,pH为9.5~10.0时SDH活力最高。
 正常值
 健康成人(n=60)血清:0~3.1U/L。