所谓星活性又称Star活性。是指由于反应条件不同而产生的切断与原来认识序列不同的位点的现象,也就是说产生Star活性后,不但可以切断特异性的识别位点,还可以切断非特异性的位点。产生Star活性的结果是酶切条带增多。 所以说Star活性与粘端变平端没关系。另外,Star活性除了与酶本身的性质有关外,与甘油浓度,pH值及离子浓度有关。 一般正规厂家生产的限制酶出厂前都做相关的检测,buffer体系也都做了相应的考虑。因此正常情况下酶切,可以先不必考虑Star活性的问题。 一旦出现底物DNA不好切断,需要增加酶量或延长反应时间时,如果使用的是易产生StaR活性的限制酶切,一般优先考虑增加酶量,而不是延长反应时间,换句话说,延长时间比增加酶量更易产生Star活性。 另外,实际上几乎所有的限制性内切酶都可能产生Star活性。但目前Star活性对实际实验室操作过程中的影响并不太大,可以先不考虑。 星活性是特异性的限制性内切酶介导的DNA裂解,可以从这些酶的最适显着不同的反应条件下发生的松弛或改动的。其结果通常是在非规范的识别位点裂解,或有时完全丧失的特异性。 这可能会导致星活性的差异包括低离子强度,pH值高,和高(> 5%体积/体积)甘油的浓度。[ 1 ]的是后者的条件的特定的实际利益,因为商业的限制性内切酶在一个缓冲器中,通常提供含有大量的甘油(50%v / v是典型的),也就是说稀释的酶溶液不足可导致星活性;此问题最经常出现在双重或多重消化