磷酸钙-DNA 共沉淀法(calcium phosphate-DNA coprecipitation),简称磷酸沉淀法,能把外源基因与入噬菌体DNA 的重组子导人大肠杆菌和哺乳动物细胞。 磷酸钙沉淀法因为试剂易取得、价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究,先将DNA和CaCl2混合,然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸钙沉淀,最后把含有沉淀的混悬液加到培养的细胞上,通过细胞胞膜的内吞作用摄入DNA。 磷酸钙似乎还通过抑制血清中和细胞内的核酸酶活性而保护外源DNA免受降解.
以HPV-18 DNA 为供体、小牛胸脉DNA 为载体,NIH 3T3细胞为受体细胞,应用磷酸钙沉淀法将供体DNA 引入细胞内,得到了清晰的NIH 3T3细胞形态学转化灶。
NIH 3T3 cells were transfected by human papillomavirus 18(HPV 18). HPV 18 DNA as donor and calf thymus DNA as vector. Calcium phosphate technique was used.
本研究认为鱼精蛋白改性磷酸钙是一种比共沉淀法合成磷酸钙更好的转染载体。
It could be expected that nucleoprotamine modified calcium phosphate could be a better transfect agent as compared to coprecipitated superphosphate.
方法:人血管形成素- 1重组粘粒与DNA末端蛋白复合物混合后以磷酸钙共沉淀法转染2 93细胞。
METHODS: Angiopoietin-1-PAxCAwt cosmid DNA and adenoviral DNA-TPC were cotransfected to 293 cells by the use of calcium phosphate precipitation method.
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